Биология » Структура и состав биологических мембран » Критерии чистоты мембранных фракций

Критерии чистоты мембранных фракций
Страница 1

Пожалуй, наиболее объективным критерием чистоты выделенной мембранной фракции является присутствие в ней какого-либо уникального компонента, который содержится только в этой мембране или является в ней преобладающим. Обычно такими компонентами служат ферменты, которые в данном случае называют маркерами. Список маркерных ферментов, которые используются для контроля чистоты мембранных фракций, приведен в табл.1.2 При определении активности фермента следует принимать во внимание, что он может находиться в латентной форме, например благодаря тому, что локализуется на внутренней поверхности выделяемых мембранных везикул. Другие проблемы, связанные с оценкой чистоты выделенных мембран, рассмотрены в обзоре. Следует отметить, что рекомендуемые методы в большинстве случаев достаточно хорошо отработаны и стандартизованы.

В ряде случаев более удобными мембранными маркерами являются не ферменты, а специфические рецепторы лектинов, гормонов, токсинов или антител. Если изучаемые системы хорошо охарактеризованы, то о чистоте мембранной фракции можно судить по ее белковому составу, определяемому с помощью электрофореза в полиак-риламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия. Например, наружная мембрана грамотрицательных бактерий имеет характерный набор полипептидов, которых нет в цитоплазматической мембране.

Таблица 1.2 Маркеры, используемые для контроля чистоты мембранных фракций, выделяемых из клеток млекопитающих "

Мембранная фракция

Маркерный фермент

Плазматические мембраны

5 '-Нуклеотидаза

Щелочная фосфодиэстераза

Na */К+-АТРаза (базолатераль-

ная мембрана эпителиальных

клеток)

Аденилатциклаза (базальная

мембрана гепатоцитов)

Аминопептидаза (мембрана

щеточной каемки эпителия)

Митохондрии (внутренняя

Цитохром с-оксидаза

мембрана)

Сукцинат-цитохром с-оксидо-

редуктаза

Митохондрии (наружная

Моноаминооксидаза

мембрана)

Лизосомы

Кислая фосфатаза

0-Галактозндаза

Пероксисомы

Каталаза

Уратоксидаза

Оксидаза D-аминокислот

Мембраны аппрата

Галактозилтрансфераза

Гольджи

Эндоплазматический

Глюкозо-6-фосфатаза

ретикулум

Холинфосфотрансфераза

NADPH-цитохром с-оксидо-

редуктаза

Цитозоль

Лактатдегидрогеназа

Страницы: 1 2

Статьи и публикации:

Пшеница
Пшеницу человек возделывает более 10 тыс. лет. Но в разные эпохи люди выращивали разные виды пшеницы (всего род пшеница включает их около 20). Вспомним, например, "Сказку о попе и работнике его Балде" А. С. Пушкина. Нанимаясь на ...

Применение продукта
Глутамат натрия применяют для усиления природных вкусовых свойств пищевых продуктов, сохранения вкусовых качеств пищевых продуктов при длительном хранении, восстановления первоначального вкуса в продуктах, которые подвергаются термической ...

Теплопродукция и теплоотдача
Суммарная теплопродукция (теплообразование) в организме состоит из так называемой первичной теплоты, выделяющейся в ходе постоянно протекающих во всех органах и тканях реакций обмена веществ, и вторичной теплоты, образующейся при расходов ...